Dit artikel bundelt de resultaten van het interdisciplinaire onderzoek dat het Koninklijk Instituut voor het Kunstpatrimonium in 2020 uitvoerde van het Portret van Johannes Despauterius. Daarbij waren vier diensten betrokken: wetenschappelijke beeldvorming, wetenschappelijke analyses, dendrochronologie en het studiecentrum Vlaamse Primitieven. Het opzet van het onderzoek was om de schildertechniek te bestuderen, de materiele geschiedenis van het schilderij te documenteren en om het werk in zijn historische context te situeren inzake datering en toeschrijving.